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第1章　总论1

第一节　概述1

第二节　常用染色技术1

一、细胞免疫荧光染色技术2

二、核酸荧光染色技术4

三、荧光微球捕获染色技术4

第三节　基本检验流程6

一、标本的采集、运送与储存6

二、标本处理6

三、开机6

四、仪器光路与流路的检查与校准7

五、上机测定7

六、结果分析9

七、检验报告10

八、仪器清洗11

九、关机11

第四节　方法学特点11

一、单细胞分析11

二、定量分析11

三、快速性11

四、准确性11

五、特异性11

六、重复性12

七、多参数分析12

第2章　临床型流式细胞仪13

第一节　结构特点与工作原理13

一、结构特点13

二、工作原理14

第二节　技术指标15

一、荧光测量灵敏度15

二、分辨率15

三、前向散射光检测灵敏度15

四、分析速度15

第三节　技术特色16

一、门与设门16

二、图像数据资料显示17

三、FS阈值设定18

四、补偿设置19

第四节　使用方法与技巧20

一、开机程序20

二、光路和流路的检测程序20

三、清洗程序20

四、关机程序21

五、检验方案的编辑21

六、新编辑检验方案参数的调试25

第五节　常见故障排除与维护29

一、常见故障排除29

二、仪器的维护常识31

第六节　流式细胞仪工作术语32

第3章　常见影响因素35

一、温度35

二、pH35

三、荧光染料浓度36

四、杂质36

五、细胞固定剂36

六、溶液黏度37

七、其他因素37

第4章　标本的采集、运送与保存38

第一节　标本采集38

一、免疫功能分析类标本38

二、血小板分析类标本39

三、白血病细胞免疫分型类标本40

四、DNA分析类标本40

五、其他流式检验项目标本41

第二节　标本运送43

一、运送方法43

二、注意事项44

第三节　标本保存44

一、短期保存44

二、长期保存46

第5章　单细胞悬液的制备49

第一节　概述49

一、物理法49

二、酶学法49

三、化学法50

第二节　各种悬液的制备50

一、血液单细胞悬液50

二、骨髓单细胞悬液52

三、脱落细胞单细胞悬液53

四、实体瘤组织单细胞悬液54

五、石蜡包埋组织单细胞核悬液57

六、培养细胞单细胞悬液58

第6章　机体造血功能监测60

第一节　CD34+干细胞的测定60

一、造血干细胞移植60

二、CD34+干细胞检测的基本原理63

三、国外常用CD34+干细胞流式细胞检验方法63

四、造血干细胞和造血祖细胞的分类检测66

第二节　网织红细胞测定71

第三节　网织血小板测定73

第7章　机体免疫功能监测78

第一节　T淋巴细胞及其亚群的检测78

一、总T淋巴细胞、T4淋巴细胞和T8淋巴细胞79

二、Th细胞和Ti细胞95

三、Tc细胞和Ts细胞97

四、Th1和Th2细胞100

五、Tc1和Tc2细胞107

六、αβT淋巴细胞和γδT淋巴细胞111

七、初始T细胞和记忆T细胞113

八、活化T细胞116

第二节　B淋巴细胞及其亚群的检测119

一、B淋巴细胞119

二、B1和B2淋巴细胞122

第三节　NK细胞的检测124

第四节　单核细胞的检测127

第五节　机体免疫功能监测的质量控制130

第8章　机体凝血功能监测132

第一节　血小板的形态、结构与功能132

一、形态132

二、结构133

三、功能135

第二节　血小板流式检验现状136

梅三节　血小板精确计数137

一、单平台法137

二、双平台法140

第四节　活化血小板测定143

一、循环活化血小板测定143

二、体外刺激活化血小板测定146

三、血小板-白细胞聚集体检测149

四、血小板-单核细胞聚集体测定151

第五节　血小板膜糖蛋白检测154

第六节　血小板微粒测定157

第9章 自身免疫性疾病的鉴别诊断162

第一节　红细胞表面相关免疫球蛋白的测定162

第二节　粒细胞表面相关免疫球蛋白的测定165

第三节　血小板表面相关免疫球蛋白的测定167

第10章　肿瘤临床中的应用172

第一节　细胞周期与DNA倍体检测172

第二节　细胞凋亡检测179

一、PI染色法179

二、Annexin V-PI染色法182

三、APO 2.7测定法185

四、末端转移酶标记（TUNEL）法187

第三节　肿瘤化疗多药耐药性监测191

第11章　白血病免疫诊断与分型196

第一节　正常骨髓造血细胞分化成熟的抗原表达规律196

一、粒系和单核系细胞抗原196

二、淋巴细胞分化发育的抗原198

三、T系、B系和髓系的特异性标志抗原199

第二节 白血病免疫诊断与分型的基本原理与意义199

一、白血病免疫分型的发展199

二、流式细胞免疫分型的基本原理200

三、流式细胞免疫分型的优点205

第三节　流式细胞免疫分型的检验方法206

一、主要仪器206

二、主要试剂206

三、标本采集206

四、样本制备207

五、细胞染色207

六、流式细胞仪测定208

七、数据分析与解释209

第四节 临床常见白血病类型的免疫诊断与分型要点210

一、前驱B和T急性淋巴细胞白血病／淋巴母细胞淋巴瘤210

二、慢性淋巴细胞白血病／小淋巴细胞淋巴瘤211

三、急性髓系白血病212

四、急性未定系列白血病220

第五节　临床少见白血病类型的免疫诊断与分型要点221

一、毛细胞白血病221

二、浆细胞骨髓瘤／浆细胞瘤221

三、幼稚淋巴细胞白血病221

四、T细胞大颗粒淋巴细胞白血病222

五、侵袭性NK细胞白血病222

六、成人T细胞白血病223

第六节　新进展223

一、不设门流式方法的应用223

二、介绍几个较有用的组合224

第七节　质量控制225

一、有效的样本制备技术225

二、流式细胞仪的校准和优化设置225

三、细胞系别与类型判定226

第12章　强直性脊柱炎的鉴别诊断228

第一节 Beckman-Coulter HLA-B27/HLA-B7表达的测定228

第二节 BD HLA-B27/CD3表达的测定232

第13章　阵发性睡眠性血红蛋白尿的鉴别诊断237

第一节　红细胞表面CD55和CD59表达的测定237

第二节 白细胞表面CD55和CD59表达的测定240

第三节 白细胞的FLAER法测定245

第14章　细胞因子测定249

第一节　流式微球分析技术与流式液相芯片技术249

第二节　人类Th1/Th2细胞因子的检测250

第15章　质量控制257

第一节　室内质量控制257

一、分析前对样本和试剂的质量控制257

二、分析中仪器及检测过程的质量控制259

三、分析后数据传输的质量控制262

第二节　室间质量评价262

一、国家卫生部流式检验室间质评262

二、国际流式检验室间质评263

附录A Multicycle DNA含量与细胞周期分析软件264

附录B　临床常见流式检验指标的正常参考范围299

附录C　临床流式细胞学检验技术相关名词305

附录D　常用流式检验试剂的配制308